Uvod i ključne značajke
1. Osnovna struktura:
Sterilno, jednokratno: najmodernijeserološke pipeteizrađeni su od polistirena i dolaze pojedinačno zamotani u sterilno pakiranje za korištenje u aseptičnim tehnikama.
Graduirana ljestvica: ima kalibrirane oznake volumena duž svoje duljine. Postoje dvije glavne vrste:
Za isporuku (TD): Kalibrirano za isporuku navedenog volumena kada se tekućina ispušta gravitacijom (ili blagim ispuhom, ovisno o vrsti). Najčešći.
Sadržati (TC): Manje uobičajeno za serološke pipete; kalibriran za zadržavanje volumena, zahtijevajući ispiranje za isporuku pune količine.
Ispis: Jasno prikazuje ukupnu zapreminu (npr. 10 ml), korake stupnjevanja i često boju-kodiranu traku za brzu identifikaciju.
Prepoznatljiva značajka -ventilirano/filtrirano ili ne{1}}filtrirano:
Ventilirane/filtrirane pipete: imajte čep od pamuka ili aerosola u blizini nastavka za usta. To sprječava kontaminaciju kontrolera pipete i neophodno je za sterilan rad s biološkim tekućinama i staničnom kulturom.
Ne{0}}filtrirane pipete: Nedostaje ova barijera. Koristi se za ne-sterilan rad ili s ne-opasnim kemikalijama.
II. Vodič za korištenje korak-po-korak (aseptična tehnika)
Potrebna oprema: sterilna serološka pipeta, kontroler pipete (ručna žarulja, električna/zelena pipe-pomoć), spremnik za otpad, sterilna boca s reagensom, laboratorijska kuta, rukavice.
Postupak:
1. Priprema:
Provjerite je li vaš radni prostor (npr. napa s laminarnim protokom) čist i dezinficiran.
Imajte sve materijale nadohvat ruke.
Provjerite je li pakiranje pipete ispravno i rok valjanosti.
2. Odabir i otvaranje pipete:
Odaberite veličinu pipete s odgovarajućim rasponom i točnošću za svoj volumen. Na primjer, koristite pipetu od 5 mL za prijenos 4,5 mL, a ne pipetu od 25 mL.
Otvorite omot na urezu ili označenoj točki otvaranja. Nemojte potpuno ukloniti pipetu; otkrijte samo kraj nastavka za usta.
Za ventilirane pipete: Čvrsto pričvrstite izloženi nastavak za usta na kontroler pipete.
3. Tekućina za usisavanje:
Držite regulator pipete okomito. Uronite vrh pipete u tekućinu na odgovarajuću dubinu (nekoliko milimetara) kako biste izbjegli usisavanje zraka.
Pritisnite gumb za usisavanje na kontroleru ili stisnite bulb. Aspirirajte malo iznad željenog konačnog volumena kako biste uzeli u obzir meniskus.
Nakratko zastanite da se tekućina slegne. Držite pipetu okomito.
4. Očitavanje meniska:
Ovo je kritično za točnost. Tekućina tvori zakrivljenu površinu (meniskus).
Očitajte volumen na dnu meniskusa (najniža točka krivulje), poravnavajući ga s linijom graduiranja u razini očiju.
Kako biste prilagodili točan volumen, pažljivo istisnite višak tekućine natrag u izvorni spremnik ili čašu za otpad.
5. Tekućina za točenje:
Dodirnite vrhom pipete unutarnju stijenku prihvatne posude (npr. tikvice, jažice ploče) pod blagim kutom.
Dvije tehnike doziranja:
Gravitacijska drenaža: pritisnite gumb za sporo/promjenjivu{0}}brzinu doziranja kako biste omogućili ispuštanje tekućine gravitacijom. Ovo je standard.
Ispuh-: Mnoge serološke pipete (označene matiranim prstenom ili dvostrukim prstenom pri vrhu) kalibrirane su za isporuku punog volumena tek kada se posljednja kap "ispuha" pomoću funkcije brzog/-ispuhivanja kontrolera. Provjerite oznaku pipete.
Kako biste osigurali potpunu isporuku, povucite vrh uz stijenku posude dok završite s ispuštanjem.
6. Odbacivanje:
Iskorištenu pipetu stavite izravno u spremnik napunjen odgovarajućim dezinficijensom (npr. 10% izbjeljivač) ili u kantu za oštre predmete/kantu za plastični otpad. Nemojte ponovno zatvarati niti ponovno koristiti.